近日，中科院大連化學(xué)物理研究所鄒漢法研究員帶領(lǐng)的研究團(tuán)隊(duì)（1809組）與荷蘭蛋白質(zhì)組學(xué)研究中心主任Heck教授領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)合作，對該研究組發(fā)展的用于磷酸肽富集的新一代固定化金屬離子親和色譜技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)評價(jià)，相關(guān)結(jié)果發(fā)表在最新一期的Nature Protocols上(2013，8，461-480) (http://www.nature.com/nprot/journal/v8/n3/abs/nprot.2013.010.html)。
固定化金屬離子親和色譜(IMAC) 是磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究中最常用的磷酸化肽段富集技術(shù)之一，常規(guī)的IMAC使用的螯合基團(tuán)有三羧甲基乙二胺、次氨基乙酸、亞氨基二乙酸等，在螯合鐵、鎵等金屬離子后可用于磷酸肽的富集。其缺點(diǎn)是特異性不高，在富集磷酸肽的同時(shí)也富集了一些酸性肽。研究人員發(fā)現(xiàn)了磷酸酯鋯或鈦表面與磷酸肽之間的高特異性相互作用，并利用這一相互作用建立了以磷酸基團(tuán)為螯合配體的新一代固定化金屬離子親和色譜技術(shù)。實(shí)驗(yàn)表明，該新型IMAC對磷酸肽富集的特異性優(yōu)異，可以有效避免酸性肽段的非特異性吸附。與傳統(tǒng)的IMAC相比較，其對磷酸肽的富集能力提高3-10倍，從而大大提高了蛋白質(zhì)磷酸化分析的檢測靈敏度和鑒定覆蓋率。該新型IMAC方法自2006年發(fā)表首篇論文以來，已在Mol. Cell. Proteomics, J. Proteome Res., Anal. Chem.等蛋白質(zhì)組學(xué)與分析化學(xué)權(quán)威期刊發(fā)表論文20余篇，其中2007年發(fā)表在Mol. Cell. Proteomics的一篇論文已經(jīng)被引用110余次。采用該方法為核心技術(shù)進(jìn)行了人類肝臟蛋白質(zhì)磷酸化的規(guī)?；蛛x鑒定，建立了迄今為止國際上人類肝臟蛋白質(zhì)磷酸化的最大數(shù)據(jù)集 (Mol. Cell. Proteomics，2012，11，1070-1083)。
磷酸酯鋯或鈦表面與磷酸肽之間的高特異性相互作用示意圖
該新型IMAC富集材料的制備技術(shù)具有獨(dú)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)，已獲中國、美國專利授權(quán)各1項(xiàng)，目前正在美國進(jìn)行商業(yè)化評估，以期在商品化后能夠得到更廣泛的推廣應(yīng)用。
