現(xiàn)有基于熒光染色的活體單細胞分選技術(Fluorescence-Activated Cell Sorting; FACS)一般需要外加熒光標記,在單位時間只能獲得個別分子所代表的表型,且通常難以直接進行“原位”觀測。而基于拉曼顯微光譜技術的單細胞分選方法無需外加標記,可無損獲得整個單細胞的化學物質(zhì)指紋圖譜,從而迅速識別活體單細胞的種系發(fā)生、生理特性和代謝產(chǎn)物變化等,因此對于難培養(yǎng)微生物的功能鑒定和資源開發(fā)具有重要意義。
近日,中國科學院青島生物能源與過程研究所單細胞研究中心功能基因組團隊助理研究員王允、籍月彤等通過優(yōu)化光路、提高激光強度等方式顯著提高了單細胞拉曼光譜的采集速度,首次將微生物細胞拉曼圖譜獲取時間降低到毫秒級,為高通量單細胞拉曼分選奠定了基礎。同時,結合激光誘導向前轉(zhuǎn)移(LIFT)原理,發(fā)明了拉曼激活細胞彈射(Raman-activated Cell Ejection;RACE)技術,可用于將特定拉曼表型的單細胞從復雜微生物群落中分離,從而獲取其基因組信息。這一工作為單細胞拉曼分選儀(Raman-activated Cell Sorter;RACS)提供了新的一種分選方法。相關研究成果發(fā)表于最新一期的Analytical Chemistry。
上述研究由英國Sheffield大學黃巍教授和青島能源所單細胞研究中心主任徐健研究員合作主持完成。
(單細胞研究中心供稿)
原文鏈接:
Raman activated cell ejection for isolation of single cells, Analytical Chemistry (2013). URL: http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ac403107p.