工業(yè)微藻能夠?qū)㈥柟夂蜔煹罋庵苯愚D(zhuǎn)化為生物柴油,因此是應(yīng)對全球氣候變暖的重要舉措之一。然而煙道氣中高濃度的CO2及其導(dǎo)致的酸性培養(yǎng)條件,往往抑制了微藻的生長,因此提高CO2耐受性是設(shè)計與構(gòu)建超級光合固碳細胞工廠的關(guān)鍵瓶頸之一。近期,青島能源所單細胞中心通過逆轉(zhuǎn)進化時針的研究思路,率先闡明了工業(yè)微藻應(yīng)對高濃度CO2的機制,并開發(fā)出高CO2耐受的工業(yè)產(chǎn)油微藻細胞工廠。這一工作不僅對于工業(yè)煙道氣直接轉(zhuǎn)化生物柴油具有應(yīng)用價值,對于人類生存空間的拓展也有重要意義。該成果于3月21日在線發(fā)表于《Metabolic Engineering》。
人類活動排放的CO2等溫室氣體,導(dǎo)致了全球氣候變化和海洋酸化等重大環(huán)境和社會問題。利用工業(yè)產(chǎn)油微藻將煙道氣等工業(yè)CO2排放源直接轉(zhuǎn)化為柴油等先進生物燃料,對于減少溫室氣體排放、遏制全球氣候變暖具有重大的戰(zhàn)略意義。包括微藻在內(nèi)的海洋浮游植物適應(yīng)了當前地球大氣0.04%的CO2含量,每年固定了全球CO2固定量的40%。但是,煙道氣中的CO2含量高于5%,是大氣碳含量的百倍以上。由此導(dǎo)致的培養(yǎng)環(huán)境酸化,在降低了生物污染發(fā)生幾率的同時,也通常會抑制工業(yè)產(chǎn)油微藻的生長與繁殖,從而大幅度降低了工業(yè)生物固碳產(chǎn)油過程的經(jīng)濟性。微擬球藻(Nannochloropsis spp.)是一種在世界各地均可室外大規(guī)模培養(yǎng)的工業(yè)產(chǎn)油微藻。它們具有生長速度快、二氧化碳耐受能力強、海水淡水均可培養(yǎng)、遺傳操作較完善等突出優(yōu)點。單細胞中心魏力等研究人員,提出其利用和耐受CO2均與碳濃縮機制(Carbon Concentrating Mechanism; CCM)有關(guān)的科學假設(shè)。首先,運用系統(tǒng)生物學思路,結(jié)合亞細胞定位等研究手段,挖掘到與高CO2應(yīng)激相關(guān)的一個關(guān)鍵靶點,即位于細胞質(zhì)內(nèi)的一個特殊的碳酸酐酶(Carbonic anhydrase;CA2)。與5% CO2培養(yǎng)下相比,CA2在極低CO2濃度下被特異性地激活,因此是CCM系統(tǒng)感受與應(yīng)對環(huán)境中CO2濃度的關(guān)鍵基因。
進而,研究人員提出,既然CCM是藻類從遠古大氣(高濃度CO2環(huán)境)逐漸適應(yīng)當前大氣(低濃度CO2環(huán)境)的進化結(jié)果,如果人為地破壞或抑制CCM活性,是否能夠“逆轉(zhuǎn)進化的時針”,人為實現(xiàn)工業(yè)微藻的“返祖”,從而恢復(fù)其對高濃度CO2的適應(yīng)性呢?實驗證明,在5% CO2下,靶向敲低CA2基因的工程微擬球藻株,其生物質(zhì)產(chǎn)量能提高超過30%,而且含油量不受影響。這一優(yōu)良性狀在多種類型的光培養(yǎng)設(shè)施和多種空間尺度的培養(yǎng)規(guī)模下均能展現(xiàn),而且具有相當?shù)倪z傳穩(wěn)定性。進一步研究發(fā)現(xiàn),CA2的敲低,顯著改善了胞內(nèi)pH值微環(huán)境,從而緩解了胞外高濃度氫離子對于細胞的毒害作用,最終維持了生物量的增長(圖1)。有趣的是,工程藻株的生長優(yōu)勢只在煙道氣培養(yǎng)條件下展現(xiàn),若在空氣濃度CO2下,工程藻株則喪失了生長優(yōu)勢。因此,本研究不僅證明工業(yè)微藻CO2含量適應(yīng)性可以理性調(diào)控,而且發(fā)明了一種原創(chuàng)的工程藻株生態(tài)控制策略。
如何提高糧食和能源作物的CO2利用效率,一直是業(yè)界孜孜以求的目標?,F(xiàn)有的工作通常以CCM活性的促進和提高為核心思路,以提高作物的固碳效率。本研究“反其道而行之”,首次提出,通過逆轉(zhuǎn)CCM的進化腳步,抑制其活性,能夠提高作物在高CO2條件下的產(chǎn)量。
這一新思路不僅對于工業(yè)煙道氣直接轉(zhuǎn)化生物柴油具有應(yīng)用價值,對于人類生存空間的改造與拓展也有啟發(fā)。例如,作為除金星外距離地球最近的行星,火星是最有希望實現(xiàn)載人登陸的地外行星,乃人類未來移民的首選目的地。但是火星大氣中95%是CO2,因此火星大氣組成的改造是人類大規(guī)模殖民火星的前提。本研究展示的高CO2耐受性的工業(yè)微擬球藻,不僅能夠?qū)?span lang="EN-US" style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman", "serif"">CO2轉(zhuǎn)化為氧氣,而且能夠按需生產(chǎn)生物柴油和食用油脂,因此或許可作為第一代火星移民,肩負改造火星大氣層的重任。
這項工作由青島能源所單細胞研究中心徐健研究員與德國魯爾大學Ansgar Poetsch教授主持,同時得到了中科院水生所的胡強研究員和胡晗華研究員等的幫助。該研究獲得了中科院CO2重點部署項目、研究所“一三五”項目和國家自然科學基金的支持。(文/圖 魏力)
https://doi.org/10.1016/j.ymben.2019.03.004