硝酸鹽(NO3?)是陸地和水生生態(tài)系統(tǒng)重要的氮形式。隨著化石燃料燃燒和農(nóng)業(yè)活動(dòng)的增加,各種生態(tài)系統(tǒng)的硝酸鹽含量在增加。在區(qū)域乃至全球尺度上硝酸鹽的源和動(dòng)力學(xué)的研究變的至關(guān)重要,其中硝酸鹽的15N和18O穩(wěn)定同位素豐度( 15N和 18O)作為一種研究的技術(shù)手段已經(jīng)被廣泛應(yīng)用。過去二十多年,硝酸鹽氮氧同位素測定方法主要包括硝酸銀法、反硝化細(xì)菌方法和疊氮酸方法。硝酸銀方法是利用離子交換,把硝酸鹽轉(zhuǎn)為為硝酸銀,然后用元素分析儀最終轉(zhuǎn)換成N2和CO2進(jìn)行分析,該方法前處理步驟繁瑣,需要樣品量大( > 1 mol N) ,而且該方法只適用淡水,不適合海洋水和土壤KCl浸提液。反硝化細(xì)菌的方法最終分析物是N2O,極大減少了樣品需求量,但是需要具備維持反硝化細(xì)菌。疊氮酸法于十年前建立,是一種化學(xué)方法。該方法利用海綿鎘或活性鎘將NO3? 轉(zhuǎn)換成 NO2?,然后使用疊氮酸醋酸緩沖液將NO2?轉(zhuǎn)化成N2O進(jìn)行分析。這種方法對樣品需求量和反硝化細(xì)菌法一樣少,也比較容易建立,但是海綿鎘或活性鎘的準(zhǔn)備比較消耗時(shí)間,而且疊氮酸緩沖液產(chǎn)生的HN3具有毒性和揮發(fā)性。
中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所穩(wěn)定同位素生態(tài)學(xué)組圖影在方運(yùn)霆研究員的指導(dǎo)下改良了硝酸鹽的 15N和 18O的化學(xué)測定方法。改良的方法使用鎘粉直接替代了海綿鎘或活性鎘將NO3? 轉(zhuǎn)換成 NO2?,減少了樣品的處理時(shí)間,在第二步中極大的減少了疊氮酸醋酸緩沖液的使用量,同時(shí)使用醋酸鈉調(diào)節(jié)緩沖液的緩沖性,減少NO3?中的氧和水中的氧發(fā)生同位素交換。該方法操作簡單、制備時(shí)間短、使用范圍廣(適用于小體積樣品和KCl浸提液),容易建立。該改良方法的文章(Modifications to the azide method for nitrate isotope analysis)已發(fā)表在Rapid Communications in Mass Spectrometry上。
此前,穩(wěn)定同位素生態(tài)學(xué)組還研究出銨態(tài)氮穩(wěn)定同位素新的測定方法,羥胺法(D. W. Liu, Y. T. Fang, Y. Tu, Y. P. Pan. Chemical Method for Nitrogen Isotopic Analysis of Ammonium at Natural Abundance. Analytical Chemistry 2014, 86, 3787-3792),并把這種方法結(jié)合擴(kuò)散法用在酸性土壤KCl浸提液銨態(tài)氮同位素豐度的測定上(S. S. Zhang, Y. T. Fang, D. Xi. Adaptation of micro-diffusion method for the analysis of N-15 natural abundance of ammonium in samples with small volume. Rapid Communications in Mass Spectrometry 2015, 29, 1297-1306)。